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什么是elisa試劑盒?elisa試劑盒用來檢測什么?
什么是elisa試劑盒?elisa是一種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)，中文名字叫酶聯(lián)免疫吸附測定實(shí)驗(yàn)。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(elisa)是一種用來定量檢測樣本中的某種抗原方法。因此，因此在許多研究和檢測領(lǐng)域中使用 ELISA 來檢測和定量各種樣本類型中的抗原，如使用 ELISA 分析細(xì)胞裂解物、血樣、食品等特定物質(zhì)。常見檢測領(lǐng)域包括如生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)等。
elisa試劑盒原理
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(elisa)是一種高敏度的定量實(shí)驗(yàn)，通常用于測量生物樣品中分析物的濃度，如細(xì)胞因子和抗體。這種方法的一般原理包括三個(gè)步驟：
首先是將目標(biāo)分析物捕獲或固定在微孔板上，然后用目標(biāo)特異性檢測蛋白檢測分析物，最后就是酶反應(yīng)，既共軛酶將底物轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物。根據(jù)不同的捕獲方法和檢測方法。
elisa方法
ELISA有四種主要的方法：直接法、間接法、夾心法和競爭法。每種類型的描述如下，并用圖說明了分析物和抗體是如何結(jié)合和使用的。
1.直接法(酶標(biāo)抗體結(jié)合抗原)
待測抗原粘附在微孔板的孔內(nèi)，然后使用帶酶標(biāo)的一抗與抗原結(jié)合，最后加入底物進(jìn)行顯色，并檢測吸光度。由于吸光度的大小與抗原體復(fù)合物的數(shù)量成一定的線性關(guān)系。因此，也就間接的實(shí)現(xiàn)了測定抗原數(shù)量的目標(biāo)。
2.間接法(一抗結(jié)合抗原，酶標(biāo)二抗結(jié)合一抗)
和直接法的區(qū)別在于兩種抗體代替一種抗體，結(jié)合抗原的抗體(一抗)不帶酶標(biāo)記物，當(dāng)抗原和抗體結(jié)合后，再使用帶酶標(biāo)的二抗結(jié)合一抗，加入底物顯色并檢測。
3.夾心法(捕獲抗體和一抗結(jié)合抗原，酶標(biāo)二抗結(jié)合一抗)
在間接法基礎(chǔ)上又再發(fā)展出更為復(fù)雜的夾心法，它在微孔底部預(yù)先包被一種捕獲抗體，用于結(jié)合抗原，在這個(gè)復(fù)合物的基礎(chǔ)上再結(jié)合一抗、二抗并檢測。
4.競爭法(酶標(biāo)抗原和抗原競爭結(jié)合抗體)
無法同時(shí)結(jié)合捕獲抗體和一抗的話，就不適合用夾心檢測。此時(shí)可以在微孔板孔內(nèi)包被抗體，同時(shí)提供帶標(biāo)記的同種抗原，把待檢測抗原和標(biāo)記抗原一起加入和抗體結(jié)合，由于兩者會(huì)競爭結(jié)合抗體，所以最終檢測的信號越高，證明代測抗原越少，反之則越多。
elisa試劑盒檢測步驟
ELISA 是簡單的血液檢測之一。它快速、快捷，并且需要患者的血液樣本。ELISA的整個(gè)過程如下所述。
抗體附著在作為固體表面的聚苯乙烯板上，并被細(xì)菌、其他抗體和激素吸引或具有親和力。
將抗原-抗體混合物填充到包被有抗原的微量滴定板上，然后通過洗滌除去游離抗體。
添加對一抗具有特異性的二抗，該二抗通常與酶結(jié)合。
通過清洗板去除游離的酶聯(lián)二抗。
最后，添加底物。底物被酶轉(zhuǎn)化形成有色產(chǎn)物，可以通過分光光度法進(jìn)行測量。
通過ELISA檢測表明懷孕的HCG蛋白。將血液或尿液樣本和與酶連接的純化 HCG 組合添加到系統(tǒng)中。如果測試樣品中不存在 HCG，則只有連接的酶與固體表面結(jié)合。
elisa試劑盒是用來檢測什么的
elisa檢測如下：
可以確定樣品中抗體和抗原的存在。
它在食品工業(yè)中用于檢測存在的任何食品過敏原。
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