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ELISA直接法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法和夾心優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比
以下是ELISA四種主要方法(直接法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法、夾心法)的優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比，本生綜合了高可信度來源的分析：
一、直接法
原理?：抗原直接包被于固相載體，酶標(biāo)一抗直接結(jié)合抗原并顯色?。
優(yōu)點(diǎn)?：
操作步驟少，檢測(cè)速度快(無需二抗)?。
避免交叉反應(yīng)(無二抗干擾)?。
缺點(diǎn)?：
靈敏度低(信號(hào)無放大)?。
背景高(非特異性吸附雜質(zhì)蛋白)?。
需為每種靶標(biāo)定制酶標(biāo)一抗，成本高?。
二、間接法
原理?：抗原包被后，先加一抗，再用酶標(biāo)二抗檢測(cè)一抗?。
優(yōu)點(diǎn)?：
靈敏度高(二抗信號(hào)放大)?。
經(jīng)濟(jì)靈活(一種酶標(biāo)二抗可檢測(cè)多種一抗)?。
缺點(diǎn)?：
步驟多(需二抗孵育)?。
可能交叉反應(yīng)(二抗非特異性結(jié)合)?。
三、競(jìng)爭(zhēng)法
原理?：待測(cè)抗原與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限抗體，顯色信號(hào)與待測(cè)抗原量成反比?。
優(yōu)點(diǎn)?：
適用于小分子或低純度樣本?。
數(shù)據(jù)重現(xiàn)性好?。
缺點(diǎn)?：
靈敏度與特異性較低?。
需精確控制競(jìng)爭(zhēng)條件?。
四、夾心法
原理?：雙抗體夾心抗原(捕獲抗體+檢測(cè)抗體)?。
優(yōu)點(diǎn)?：
高靈敏度與特異性(雙抗體識(shí)別不同表位)?。
無需純化抗原?。
缺點(diǎn)?：
需抗原具兩個(gè)以上抗體結(jié)合位點(diǎn)?。
注：夾心法需注意抗體配對(duì)驗(yàn)證，競(jìng)爭(zhēng)法需優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍?。
注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說明請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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